紫外可見分光光度計,是實驗室普及率很高的一款光譜儀器。按照光學(xué)構(gòu)造分,紫外可見分光光度計可分為單光束和雙光束這兩類。
單光束:主要通過單束光進(jìn)行測量。一束給定波長的光通過對照物,然后再通過實際樣品溶液,從而得到吸光結(jié)果。
雙光束:同一單色器發(fā)出的光,經(jīng)分光裝置分離出兩束光(1個參比光路,1個樣品光路,對應(yīng)2個接收器),分別測量對照樣品和實際樣品。
相較而言,雙光束紫外分光光度計可以消除參比和樣品比色皿之間的誤差和消除光源不穩(wěn)定、接收器靈敏度變化等因素的影響,特別適用于樣品結(jié)構(gòu)分析。
那么我們在選擇雙光束紫外分光光度計時應(yīng)該考慮哪些因素呢?在選擇紫外可見分光光度計時,主要從:光度準(zhǔn)確度、雜散光、光譜帶寬、穩(wěn)定性、噪聲、波長的準(zhǔn)確度和重復(fù)性這6方面進(jìn)行考量。
1、光度準(zhǔn)確度
光度準(zhǔn)確度指實際測量的光度讀數(shù)值與真值之差。它能直接反應(yīng)儀器測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確程度,是用戶對儀器的直接要求。
2、雜散光
雜散光指的是遠(yuǎn)離吸收光的其它波長的入射光。換句話說就是,不應(yīng)該有光的地方有了光。它決定了儀器分析樣品的濃度范圍,特別是濃度的上限。
當(dāng)一臺紫外可見分光光度計的雜散光一定時,被分析的試樣濃度越大,其分析誤差就越大,它能使建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線彎曲,是光譜測量中誤差的主要來源。這個值當(dāng)然越小越好了。
3、光譜帶寬
光譜帶寬,指從單色器射出的單色光譜線強(qiáng)度輪廓曲線的1/2高度處的譜帶寬度。
按照比耳定律,光譜帶寬應(yīng)該是越小越好的。但是如果儀器的光源能量弱,光學(xué)傳感器的靈敏度低時,光譜帶寬小了,也得不到理想的測量結(jié)果的。
所以,選擇和使用儀器時一定注意。
4、穩(wěn)定性
穩(wěn)定性是使用者最關(guān)注的指標(biāo)之一。儀器的宗旨是穩(wěn)定可靠,不穩(wěn)定更談不上可靠了。
5、噪聲
噪聲也是儀器的重要指標(biāo)之一。它主要影響或限制的是被測試樣濃度的下限。
6、波長的準(zhǔn)確度和重復(fù)性
儀器的每個值都是在一定的波長下測得的,如果所示的波長和實際波長偏差甚遠(yuǎn),那么測出的值和真值的吻合度從何談起呢?由此可見這個指標(biāo)的重要性。
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